林产化学与工业 ›› 2007, Vol. 27 ›› Issue (6): 41-46.
赵林果, 游丽金, 孟鹏, 余世袁
ZHAO Lin-guo, YOU Li-jin, MENG Peng, YU Shi-yuan
摘要: 采用硫酸铵盐析、Phenyl Sepharose CL-4B疏水层析、DEAE-Sepharose阴离子交换层析、Sephacryl S-200凝胶过滤层析等步骤,从黑曲霉的发酵液中获得了凝胶电泳均一的两种β-葡萄糖苷酶.其中一种为耐高糖的β-葡萄糖苷酶,葡萄糖抑制系数(Ki)为41.01mmol/L,纯化倍数和得率分别为5.7倍和22.%.耐高糖β-葡萄糖苷酶单亚基分子质量为114.ku,以对硝基苯酚-β-D--葡萄糖苷(pNPG)为底物时,米氏常数(Km)值和酶促反应的最大速率(vmax)分别为0.904mmol/L和1.08μmol/min.该酶最适反应温度0℃,最适反应pH值为4.0;在0℃以下及pH值3~7范围内均能保持稳定.所测定的化学试剂中,Ag+对酶具有较强的抑制作用,其它金属离子及乙二胺四乙酸对酶的活性影响不大.甲醇、正丁醇有明显激活酶活性的作用,但乙腈、丙酮对酶的抑制作用明显.
中图分类号: